PEMBENTUKAN STRUKTUR SEL TIGA DIMENSI (3D) PADA SEL MCF-7 UNTUK PENGUJIAN SITOTOKSIK

  • Anita Sukmawati
  • Ratna Yuliani
  • Nur Aini
Keywords: forced-floating, MCF-7, sel kultur, tiga dimensi, sitotoksik

Abstract

Penggunaan struktur sel 2 dimensi (2D) untuk pengujian senyawa sitotoksik telah secara rutin dilakukan. Tetapi model 2D ini tidak dapat menyerupai kompleksitas sel in vivo, sehingga aktivitas antikanker  yang dihasilkan mungkin akan berbeda. Kultur sel tiga dimensi (3D) memiliki bentuk yang menyerupai jaringan tumor invivo, terutama adanya interaksi matriks ektraseluler (extracellular matriks, ECM) pada sel sehingga diharapkan mampu meningkatkan sensitifitas pengujian sitotoksik. Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi pembentukan sel kultur 3D pada sel MCF-7 menggunakan metode forced-floating. Pembentukan struktur 3D dilakukan dengan melakukan variasi kecepatan sentrifugasi pada sel MCF-7. Variasi kecepatan yang digunakan adalah 0 (tanpa sentrifugasi), 800, 1000, 2000, 2700, 3900, 5500 dan 11000 rpm. Diameter sel aggregate yang terbentuk dievaluasi menggunakan mikroskop mulai hari ke-4.  Pengukuran diameter aggregate dilakukan menggunakan software ImageJ. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pembentukan aggregate yang memenuhi syarat untuk pengujian aktivitas anti kanker pada kultur sel 3D didapatkan dengan kondisi tanpa sentrifugasi. Kondisi ini menghasilkan agregat sel MCF-7 dengan diameter 1017 ±17 µm dan stabil selama 10 hari.

References

Achilli, T., Meyer, J., & Morgan, J. R. (2012). Advances in the formation, use and understanding of multi- cellular spheroids. Expert Opin Biol Ther, 12(10), 1347–1360. http://doi.org/10.1517/14712598.2012.707181.Advances
Breslin, S., & O’Driscoll, L. (2013). Three-dimensional cell culture: The missing link in drug discovery. Drug Discovery Today, 18(5–6), 240–249. http://doi.org/10.1016/j.drudis.2012.10.003
do Amaral, J. B., Rezende-Teixeira, P., Freitas, V. M., & Machado-Santelli, G. M. (2011). MCF-7 Cells as a Three-Dimensional Model for the Study of Human Breast Cancer. Tissue Engineering Part C: Methods, 17(11), 1097–1107. http://doi.org/10.1089/ten.tec.2011.0260
Ho, W. Y., Yeap, S. K., Ho, C. L., Rahim, R. A., & Alitheen, N. B. (2012). Development of Multicellular Tumor Spheroid (MCTS) Culture from Breast Cancer Cell and a High Throughput Screening Method Using the MTT Assay. PLoS ONE, 7(9). http://doi.org/10.1371/journal.pone.0044640
Imani, R., Hojjati Emami, S., Fakhrzadeh, H., Baheiraei, N., & Sharifi, A. M. (2012). Optimization and comparison of two different 3D culture methods to prepare cell aggregates as a bioink for organ printing. Biocell, 36(1), 37–45.
Loessner, D., Kobel, S., Clements, J., Lutolf, M., & Hutmacher, D. (2013). Hydrogel Microwell Arrays Allow the Assessment of Protease-Associated Enhancement of Cancer Cell Aggregation and Survival. Microarrays, 2(3), 208–227. http://doi.org/10.3390/microarrays2030208
Stadler, M., Scherzer, M., Walter, S., Holzner, S., Pudelko, K., Riedl, A., Dolznig, H. (2018). Exclusion from spheroid formation identifies loss of essential cell-cell adhesion molecules in colon cancer cells. Scientific Reports, 8(1), 1–16. http://doi.org/10.1038/s41598-018-19384-0
Published
2019-01-21